酿酒酵母INVSc1菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。
菌种保藏由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。
1. 酿酒酵母INVSc1菌种培养试剂的保存:
血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。
培养基: 2oC – 8oC避光保存。
完全培养基: 2oC – 8oC避光保存,并在2周内用完。
尽量缩短血清和培养基见光的时间
2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法:
很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。酿酒酵母INVSc1菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide(如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一) 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定,降解比较慢,提高细胞的存活和生长,极大降低对细胞有毒性的氨的积累。
3.培养基中是否应加酚红:
酿酒酵母INVSc1菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类***的作用,特别是雌***。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC859NCI-H69人小细胞肺癌细胞人1640悬浮
EC860RPMI2650人鼻腔上皮细胞人DMEM贴壁
EC861RGCs大鼠视网膜神经节细胞大鼠DMEM贴壁
EC862ND7/23大鼠神经母细胞瘤细胞大鼠DMEM贴壁
EC863B10BR小鼠永生化黑素细胞小鼠1640贴壁
EC864SW260人结肠癌细胞人
EC865TCMK-1小鼠肾小管上皮细胞小鼠DMEM贴壁
EC866HOSEpiC人卵巢上皮细胞人1640贴壁
EC867MCA-205小鼠纤维肉瘤细胞小鼠1640贴壁
EC868U2932人弥漫大B淋巴瘤人1640悬浮
EC869NCI-H522 [H522] 人非小细胞肺癌细胞人1640贴壁
EC870P388小鼠白血病细胞小鼠DMEM悬浮
EC873U-373 MG人胶质瘤细胞人DMEM贴壁
EC874HEK-A人表皮角质细胞人IMDM贴壁
EC875KYSE150人食管鳞癌细胞人DMEM贴壁
EC876PAa人肺腺癌细胞人1640贴壁
EC877SNT8人NK/T细胞淋巴瘤细胞人1640悬浮
EC878MN60人B细胞白血病细胞人1640悬浮
EC879COLO-1人角质形成层细胞人IMDM贴壁
EC880Hut-102***肤T淋巴瘤细胞人1640悬浮
EC881HPMC人腹膜间皮细胞人1640贴壁
EC882SK-N-FI 人脑神经母细胞瘤细胞人DMEM贴壁
EC883OCI-LY1人B细胞淋巴瘤细胞人IMDM悬浮
EC884hRPE人视网膜色素上皮细胞人1640贴壁
EC885SG231人胆管上皮癌细胞人1640贴壁
EC886CCLP1人胆管癌细胞人DMEM贴壁
EC887hESC人子宫内膜间质细胞人EMEM贴壁